Микроскопические методы диагностики гельминтозов, или зачем нужен анализ кала на яйца гельминтов?

При подозрении на гельминтоз или в рамках профилактического медицинского обследования проводится анализ кала на яйца глистов. Эта лабораторная диагностическая процедура получила широкое распространение, ее назначают как детям, так и взрослым.

Что представляет собой анализ кала на яйца глистов?

При проведении этой манипуляции лаборант исследует фекалии на наличие яиц гельминтов. В результате этого анализа могут быть выявлены яйца практически всех паразитов, известных медицине, а это около 250 видов. В организме человека они размножаются, откладывая яйца. Большинство разновидностей гельминтов паразитируют в кишечнике человека или других частях ЖКТ. При этом яйца глистов попадают в пищеварительный тракт, а оттуда выводятся вместе с калом.

Мазок с содержанием фекалий обследуемого пациента изучается под микроскопом. Многократное увеличение позволяет увидеть в диагностическом материале яйца и личинки гельминтов.

Этот признак позволяет наверняка утверждать, что в организме паразитируют глисты одной из трех групп:

• Нематоды (аскариды, власоглав, некатор);
• Трематоды-сосальщики (шистосома, двуустка печеночная, кошачья, или ланцетовидная);
• Цестоды (цепень, лентец малый и широкий).

Кроме яиц гельминтов в кале могут быть обнаружены их оболочки, а также амебы дизентерийные, лямблии и ооцисты циклоспоридий.

Сколько готовится анализ и как проводится в условиях лаборатории

По возможности проба кала сразу же поступает в работу либо помещается в соответствующие температурные условия до начала исследований. В некоторых случаях может быть использован консервант. Подготовка пробы и особенности проведения исследования зависят от применяемого метода.

1. Макроскопические методы применяют для обнаружения зрелых гельминтов либо их фрагментов с помощью лупы, стереоскопа. Пинцетом извлекают с поверхности кала все подозрительные образования на чашку Петри, рассматривают их через лупу и под микроскопом между предметными стеклами.
2. Метод толстого мазка. Исследуется тонкий слой пробы испражнений на предметном стекле под специальным гигроскопическим целлофаном, который пропитан фенолом, глицерином и малахитовым зеленым. На стекло наносится проба кала размером с горошину, растирается стеклянной палочкой и накрывается целлофановой полоской, просветляется в течение получаса. При такой подготовке можно просмотреть в 30 раз больше препаратов.
3. Метод седиментации (осаждения). В основе лежит разность удельного веса реактивов и яиц гельминтов, которые концентрируются в осадке. Осадок получается с использованием центрифуги и далее исследуется под микроскопом. Также применяются модифицированные методы седиментации с минисистемой «Real» и одноразовых кон.
4. Метод исследования фекалий с использованием флотационных растворов. В основе методики — разность удельного веса яиц гельминтов и флотационного раствора — яйца гельминтов всплывают и концентрируются в поверхностной пленке. Далее пленка исследуется под микроскопом.

Показания к исследованию кала на яйца глистов

В качестве скрининга большого количества взрослых и детей анализ кала проводится при оформлении санитарной книжки, при поступлении в школу, детский сад и любой коллектив, где имеется риск передачи гельминтоза. Этот своеобразный барьер преграждает путь распространения паразитов.

Еще один повод проведения анализа – подозрение на гельминтоз. Поскольку глисты осуществляют свою жизнедеятельность в различных органах, симптомы паразитарной инвазии могут быть похожи на проявления патологий печени, кишечника, головного мозга, мочевого пузыря, уретры, лимфоузлов. Для дифференциации гельминтоза от других заболеваний проводится анализ кала на яйца глистов.

Симптомы гельминтоза:

• Зуд в прианальной области;
• Боль в кишечнике;
• Чередование поноса и запора, вздутие живота;
• Повышенная утомляемость и раздражительность;
• Нарушения сна;
• Вульвовагинит у женщин;
• Симптомы аллергии из-за токсического поражения организма отходами жизнедеятельности гельминтов;
• Увеличение концентрации эозинофилов в крови;
• Ночной бруксизм (скрип зубами);
• Инфекции мочеполовой системы.

У детей к перечисленным симптомам присоединяются следующие проявления гельминтоза:

• Позывы к дефекации, ничем не заканчивающиеся;
• Беспокойный сон, ночной плач, капризы;
• Раздражение области ануса;
• Кашель неизвестной этиологии.

При появлении одного или нескольких тревожных симптомов у терапевта или педиатра появляются подозрения на гельминтоз. Анализ кала на яйца глистов в сложных случаях дополняют исследованиями мокроты, желчи, желудочного сока, крови. Желательно у детей, посещающих детский коллектив, проводить такое исследование каждые полгода, а у взрослых, работающих с маленькими детьми – ежегодно.

Показания к проведению диагностики

Сдавать анализ рекомендуется не реже 1 раза в год. Наиболее актуальным исследование является для людей, имеющих повышенный риск заражения гельминтозами:

• постоянное пребывание в замкнутом коллективе (детские дошкольные и школьные учреждения, школы-интернаты, казармы и др.);
• недостаточное соблюдение правил гигиены либо невозможность их соблюдения (полевые работы);
• употребление речной рыбы, мяса, прошедших недостаточную термическую обработку;
• постоянный контакт с сельскохозяйственными домашними животными (владельцы личных подворий, сельские жители);
• разведение собак и работа с ними.

Анализ кала входит в перечень стандартных исследований при получении медицинской справки для посещения детских дошкольных, школьных и других учреждений, а также назначается при прохождении медосмотров:

1. для приема на работу;
2. в рамках периодическоого медсомотре специалистов, работающих в сферах здравоохранения, образования, общественного питания и торговли и некоторых других.

Рекомендуется сдать анализ при появлении признаков гельминтозов:

• снижение веса без видимых причин;
• постоянная слабость, одышка;
• сниженная работоспособность;
• плохой сон;
• боль в суставах и мышцах;
• тяжесть в правом подреберье;
• тошнота;
• ощущение горечи во рту;
• периодическая боль в животе, особенно в области пупка;
• нарушения стула – диареи или запоры;
• бледность кожи и слизистых;
• аллергические явления: дерматит, зуд кожи, прыщи;
• зуд в области анального отверстия.

Как подготовиться к исследованию кала на яйца глистов

Для достижения объективности исследования нужно выполнить не менее 3 проб кала. Такая тактика обусловлена особенностями жизнедеятельности гельминтов, очередное поколение которых может появиться из яиц уже после получения отрицательного результата.

Ограничения перед сдачей анализа:

• Нельзя принимать минеральное или касторовое масло (за неделю);
• Нельзя употреблять антибиотики, лекарства против диареи и паразитов, препараты магния и висмута;
• Не рекомендуется проведение ирригоскопии;
• Ограничивается употребление овощей и фруктов, провоцирующих метеоризм и диарею (капуста, груши, огурцы, свекла, апельсины);
• Нельзя пить компоты и кисели из ягод яркого цвета, меняющего цвет кала, есть их в свежем виде (вишня, малина, ежевика и др.);
• Нельзя употреблять наркотики и алкоголь.

Для сбора анализа применяют одноразовые контейнеры, приобретаемые в аптечной сети. В этом случае исключается риск присоединения яиц или личинок извне к материалу для исследования.

Сбор кала на яйца глистов

Наиболее информативным считается сбор кала во время утренней дефекации, хотя и вечерний анализ может показать объективные результаты. Образец фекалий собирают в аптечный контейнер специальным приспособлением, прилагаемым к нему. Если сбор кала проводится в другую подходящую емкость, применяют любые чистые палочки. Желательно, чтобы в контейнер попали разные образцы, как с края, так и изнутри фекальной массы.

Емкость укупоривают и отправляют в лабораторию, предварительно подписав ее. Лучше, чтобы исследование проводилось через 40-60 минут, максимум через 5-7 часов после дефекации. Следует сохранять образец кала в прохладном месте при температуре не выше +4+8°C. Если материал для анализа находился при комнатной температуре более часа, он считается непригодным для исследования.

Перианальные отпечатки

Яйца паразитирующих в кишечнике остриц и цепней можно обнаружить при микроскопии отпечатков с кожи около заднего прохода.

Перед анализом нельзя проводить туалет области ануса, а также недопустимо проводить исследование после акта дефекации. Оптимально – утром сразу после пробуждения. Для взятия анализа используется липкая лента, которая прижимается к области ануса клейкой стороной на 1-2 секунды и затем ровно наклеивается на предметное стекло. Края пленки, выступающие по краям стекла, срезают.

Чаще всего исследование проводится у детей, а отпечатки снимают родители – стекло и ленту выдает медицинская сестра поликлиники или детского садика. Хранить соскоб на энтеробиоз допускается не больше 8 часов, обеспечив температурный режим хранения не более 4 градусов (в холодильнике). Исследуются под микроскопом.

Методика проведения анализа кала на яйца глистов

В современной гельминтологии используются следующие методы копроовоскопии:

• Микроскопия нативного мазка – рассматривание при значительном увеличении препарата, приготовленного из воды и фекалий. На смазанное глицерином предметное стекло помещают кусочек кала, размоченный дистиллированной водой. Его смешивают с глицерином, накрывают покровным стеклом и анализируют при помощи микроскопа;
• Проба Фюлленборна – изучение под микроскопом пленки, образовавшейся на поверхности раствора кала с соленой водой. Если в фекалиях есть яйца, они в течение часа-полутора всплывают;
• Проба Тальмана – изучение под микроскопом центрифугированной взвеси кала, эфира и соляной кислоты.

Яйца глистов, обнаруженные в одной из проб, дают основания определить результат исследования, как положительный. Отсутствие следов гельминтов позиционируется, как отрицательный результат. Срок исполнения исследования – 1-3 дня, в зависимости от оснащенности и загруженности лаборатории.

Результаты следует показать врачу, направившему пациента на диагностику. Анализ кала на яйца глистов можно провести в бактериологической лаборатории при санэпидстанции или в частной клинике, имеющей лицензию на проведение подобных исследований.

Источники

• Lagatie O., Verheyen A., Van Hoof K., Lauwers D., Odiere MR., Vlaminck J., Levecke B., Stuyver LJ. Detection of Ascaris lumbricoides infection by ABA-1 coproantigen ELISA. // PLoS Negl Trop Dis — 2022 — Vol14 — N10 — p.e0008807; PMID:33057357
• Stehr M., Grashorn M., Dannenberger D., Tuchscherer A., Gauly M., Metges CC., Daş G. Resistance and tolerance to mixed nematode infections in relation to performance level in laying hens. // Vet Parasitol — 2022 — Vol275 — NNULL — p.108925; PMID:31605937
• Daş G., Westermark PO., Gauly M. Diurnal variation in egg excretion by Heterakis gallinarum. // Parasitology — 2022 — Vol146 — N2 — p.206-212; PMID:29978775
• Xu BL., Zhang HW., Deng Y., Chen ZL., Chen WQ., Lu DL., Zhang YL., Zhao YL., Lin XM., Huang Q., Yang CY., Liu Y., Zhou RM., Li P., Chen JS., He LJ., Qian D. . // Zhonghua Liu Xing Bing Xue Za Zhi — 2022 — Vol39 — N3 — p.322-328; PMID:29609247
• Dever ML., Kahn LP., Doyle EK., Walkden-Brown SW. Immune-mediated responses account for the majority of production loss for grazing meat-breed lambs during Trichostrongylus colubriformis infection. // Vet Parasitol — 2016 — Vol216 — NNULL — p.23-32; PMID:26801591
• Silveira AM., Costa EG., Ray D., Suzuki BM., Hsieh MH., Fraga LA., Caffrey CR. Evaluation of the CCA Immuno-Chromatographic Test to Diagnose Schistosoma mansoni in Minas Gerais State, Brazil. // PLoS Negl Trop Dis — 2016 — Vol10 — N1 — p.e0004357; PMID:26752073
• Corstjens PL., Nyakundi RK., de Dood CJ., Kariuki TM., Ochola EA., Karanja DM., Mwinzi PN., van Dam GJ. Improved sensitivity of the urine CAA lateral-flow assay for diagnosing active Schistosoma infections by using larger sample volumes. // Parasit Vectors — 2015 — Vol8 — NNULL — p.241; PMID:25896512
• Nielsen MK., Wang J., Davis R., Bellaw JL., Lyons ET., Lear TL., Goday C. Parascaris univalens—a victim of large-scale misidentification? // Parasitol Res — 2014 — Vol113 — N12 — p.4485-90; PMID:25231078
• Leles D., Cascardo P., Freire Ados S., Maldonado A., Sianto L., Araújo A. Insights about echinostomiasis by paleomolecular diagnosis. // Parasitol Int — 2014 — Vol63 — N4 — p.646-9; PMID:24780138
• Negrão-Corrêa D., Fittipaldi JF., Lambertucci JR., Teixeira MM., Antunes CM., Carneiro M. Association of Schistosoma mansoni-specific IgG and IgE antibody production and clinical schistosomiasis status in a rural area of Minas Gerais, Brazil. // PLoS One — 2014 — Vol9 — N2 — p.e88042; PMID:24505371